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扁豆凝集素的性質(zhì)研究
文章來源 : 齊岳生物
作者:小編
發(fā)布時間 : 2022-09-23 10:14:01
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產(chǎn)品名稱:扁豆凝集素的性質(zhì)研究
產(chǎn)品描述:
扁豆凝集素的性質(zhì)研究
3.1 試驗材料:
扁豆凝集素提取液,考馬斯亮藍,高碘酸-Schiff 試劑,生理鹽水,PBS緩沖液,2 %兔血細胞懸液,緩沖系統(tǒng),金屬離子,乳糖,蔗糖,麥芽糖,a-半乳糖,D-果塘和葡萄糖的蒸餾水溶液,大腸桿菌,產(chǎn)氣桿菌等PDA培養(yǎng)平板
3.2 試驗方法:
3.2.1 扁豆凝集素的基本性質(zhì)檢測
3.2.1.1 純度鑒定和糖蛋白的確定 采用柱狀圓盤聚丙烯酰胺凝膠電泳,用考馬斯亮藍和高碘酸-Schiff 試劑分別染色,根據(jù)凝膠呈現(xiàn)色帶的情況確定扁豆凝集素的純度和是否是糖蛋白。
3.2.1.2 扁豆凝集素的等電點測定 采用聚丙烯酰胺凝膠電聚焦發(fā)測定其等電點,所用凝膠濃度為7%,兩性電解質(zhì)為ph3.0-10.0的Ampholin,其較后濃度為1.5%左右,上下電極分別是5%的磷酸而后5%的乙二胺溶液。
3.2.1.3 分子量的測定 采用Bio-Gelp 100凝膠色層法,以牛血清蛋白(68000)、卵清蛋白(45000)、胃蛋白酶或乳球蛋白(35000)、和糜蛋白酶原(24500)等為標準蛋白,用1 molNaCl溶液作為平衡也和洗脫液,在?1.2×100cm玻璃柱內(nèi)進行。[6] 3.2.1.4 扁豆凝集素的活力測定 取96孔微型凝血板,在每一個孔內(nèi)滴入25μl0.9%生理鹽水。取25μl銨沉淀樣品,進行系列倍比稀釋(從前一孔吸取25μl液體,放入下一孔內(nèi),充分混合后25μl液體放入下一孔內(nèi),如此操作至倒數(shù)第二個孔),留下每一排的較后一孔,作為對照。在每一個孔內(nèi)滴入25 u1 2%兔血紅細胞,室溫下放置30 min后觀察。
3.2.2 扁豆凝集素的熱穩(wěn)定性測定 在96孔V型血凝板上加4 5μl凝集素溶液與等量PBS緩沖液倍比稀釋后,放在溫度為30℃、40℃、 50℃、60℃、 70℃、 80 ℃、 90 ℃水浴中保溫5min后取出,待其冷卻至室溫,加入等量的 2 %兔血細胞懸液,振勻。1h 后,用顯微鏡進行檢測。血凝活力以凝集素較大稀釋倍數(shù)(以2 n表示),以PBS作空白對照。比較凝集活性。
純度:99%
供應商:西安齊岳生物科技有限公司
產(chǎn)地:西安
用途:科研
包裝:mg和G級

西安齊岳生物供應一系列的凝集素;同時提供各種熒光標記修飾偶聯(lián)的凝集素。提供羅丹明、CY3、CY5、FITC、生物素Biotin、瓊脂糖Agarose、DyLight 488、DyLight 594、DyLight 649、Texas Red標記各種凝集素。
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