產(chǎn)品名稱：扁豆凝集素的分離純化

產(chǎn)品描述：

扁豆凝集素的分離純化  

試驗材料  

扁豆種子，無水，0.15 mol/L NaCl,0.02 mol/L Tris-HCl,銨，聚乙二醇， DEAE-52， Sephacryl S-300、CMFastFlow、SephadexG-25，丙烯酰胺，亞甲基雙丙烯酰胺，鏈霉蛋白酶(pronase E)，牛血清白蛋白(BSA)，對二甲基氨基小分子(DAB)、N-溴代丁二酰亞胺(NBS)。

扁豆凝集素粗品的制備：

取扁豆種子100g，去皮磨成粉末，用無水(1：4，v:v)于4℃浸泡脫脂2次。然后，用含0.15 mol/L NaCl的0.02 mol/L Tris-HCI，pH 7.8緩沖液(1：4，v:v)在4℃下浸提兩次每次24小時。 提取液經(jīng)離心(4℃，10000rpm，30 min)后，棄去沉淀，上清液采用銨分段鹽折法，取飽和度為40％～80％的沉淀，將沉淀溶于0.02mol/L Tris-HCl，pH 7．8緩沖液中得到相應(yīng)的粗品。

2.扁豆凝集素的純化  粗品4℃下充分透析除鹽，然后上經(jīng)0.02mol/L Tris-HCI,pH 7.8緩沖液平衡的DEAE-52陰離子交換柱，充分淋洗后，換用含0.5mol/LNacl的相同緩沖液進行離子線性梯度洗脫，分部收集，流速0.5 ml/min，3 ml/管，經(jīng)紫外和凝集兔紅細胞活性檢測后，收集活性部分。此活性部分對0.02 mol/L NaAc-HAc,pH 5.0緩沖液充分透析，然后上用相同緩沖液平衡的CM Fast Flow陽離子交換柱，充分淋洗后，換用含0.5 mol/LNaCl的相同緩沖液進行離子線性梯度洗脫，分部收集，流速0.5 ml/min，3 ml/管，經(jīng)紫外和凝集兔紅細胞活性檢測后，收集活性部分。此活性部分用聚乙二醇20 000濃縮后，對含0．15 mol/L NaCl的0．02mol/L Tris-HCl，pH 7.8緩沖液充分透析，并用相同緩沖液平衡Sephacryl S-300柱，然后在FPLC上進行分子篩層析純化，分部收集，流速為l ml/min，3 ml/管，經(jīng)紫外和凝集兔紅細胞活性檢測后,收集活性部分,再過Sephadex G-25柱除鹽后得扁豆凝集素純品。

純度：99%

供應(yīng)商：西安齊岳生物科技有限公司

產(chǎn)地：西安

用途：科研

包裝：mg和G級

西安齊岳生物供應(yīng)一系列的凝集素；同時提供各種熒光標記修飾偶聯(lián)的凝集素。提供羅丹明、CY3、CY5、FITC、生物素Biotin、瓊脂糖Agarose、DyLight 488、DyLight 594、DyLight 649、Texas Red標記各種凝集素。

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