產(chǎn)品名稱(chēng)：齊岳生物 一種 FITC標(biāo)記蛋白的使用方法

產(chǎn)品描述：

齊岳生物 一種 FITC標(biāo)記蛋白的使用方法

1.制備溶于0.1M碳酸鈉緩沖液( pH 9.0 )的待標(biāo)記蛋白溶液,濃度≥2mg/ml.

2 )溶解FITC于無(wú)水DMSO配制成1mg/ml的溶液。

3 )對(duì)于1ml蛋白溶液加入50μFITC溶液,可按照每次5μ的量邊加邊輕輕攪拌蛋白溶液;

4 )待所需FITC加入完畢,將反應(yīng)液于4°C避光孵育8h ;

5 )加入NH4CI使其終濃度至50mM , 4°C終止反應(yīng)2h ;

6)加入二青至濃度0.1% ,甘油至濃度5% ;

7 )通過(guò)大小孔徑合適的凝膠過(guò)濾層析分離排除未被結(jié)合的FITC ,分離范圍在20,000至50,000 (球蛋白例如抗體)。待凝膠柱平衡后,將以上反應(yīng)混合波從柱頂注入，

打開(kāi)凝膠柱,待其全部流入柱床后,加入PBS緩沖液。此時(shí),可以形成兩條帶: a,快速移動(dòng)帶,也就是FITC-蛋白標(biāo)記物,先被洗脫,通常于室內(nèi)光下可看到; b,慢速移動(dòng)帶,也就是未結(jié)合蛋白的FITC和二=青。僅僅在PBS緩沖液清洗后被洗脫出來(lái)。

8 )于4°C避光儲(chǔ)存上述偶聯(lián)物,加入0.1% ( w/v )疊氮化鈉作為-種防腐劑。若蛋白濃度較低( < 1mg/ml) , 可加入1%BSA作為-種蛋白穩(wěn)定劑。

9)標(biāo)記物中熒光素和蛋白的比值( F/P )可通過(guò)測(cè)定495nm和280nm處的吸光值來(lái)鑒定, F/P應(yīng)位于0.3-1.0。小于該比例則信號(hào)太低，高于該比例則背景太高。

 

關(guān)于我們：

西安齊岳生物科技有公司自己的實(shí)驗(yàn)室合成熒光標(biāo)記的蛋白，糖，氨基酸，高分子等產(chǎn)品，我們可以提供的熒光染料包括有以下不同波段的熒光染料產(chǎn)品，熒光染料包括以下熒光染料FITC/Rhodamine/TRITC/Comarin/Bodipy/ICG/CY3/CY3.5/CY5/CY5.5/CY7/CY7.5等等。

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主營(yíng)產(chǎn)品：COF、MOF單體系列：三蝶烯衍生物、金剛烷衍生物、四苯甲烷衍生物、peg、上轉(zhuǎn)換、石墨烯、光電材料、點(diǎn)擊化學(xué)、凝集素、載玻片、蛋白質(zhì)交聯(lián)劑、脂質(zhì)體、蛋白、多肽、氨基酸、糖化學(xué)等。